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TUhjnbcbe - 2021/9/6 15:32:00
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流式细胞术可定量地测定某一细胞中的DNA、RNA或某一特异的标记蛋白的含量,以及细胞群体中上述成分含量不同的细胞的数量,它还可将某一特异染色的细胞从数以万计的细胞群体中分离出来,以及将DNA含量不同的中期染色体分离出来,甚至可用于细胞的分选。

流式细胞分析分选的目标一般要求是活细胞,而在实际样品细胞中一般都会存在死细胞。死细胞有非特异性荧光波长,在所有通道表达量相等,对结果会有一定的影响,因此有必要去除其中的死细胞。

低浓度的DAPI溶液可去除流式细胞术中的死细胞

DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,常用于免疫荧光染核、细胞周期分析等。DAPI能够以非嵌入式的方式与DNA特异性结合。此外,由于DAPI与双链的DNA结合时其荧光强度增强20倍,与单链DNA结合时荧光强度不增强,而与RNA结合不会形成强荧光,因此在使用DAPI时无需RNase对细胞进行处理。

已有研究证明,DAPI浓度为0.2g/mL,染色时间为5min时可去除流式分析中的死细胞。

参考来源:

doi:10./j.cnki.pmb..09.

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